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要控制實(shí)驗(yàn)室的無(wú)菌環(huán)境,可以遵循以下步驟和要點(diǎn),以確保實(shí)驗(yàn)環(huán)境的無(wú)菌性和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性:
一、無(wú)菌室的設(shè)計(jì)與管理
無(wú)菌室的要求:
無(wú)菌室應(yīng)矮小、平整,高2.2~2.3米,內(nèi)部裝修應(yīng)平整、光滑,無(wú)凹凸不平或棱角等,便于擦洗及殺菌。
無(wú)菌室周?chē)柙O(shè)緩沖走廊,走廊旁再設(shè)緩沖間,其面積可小于無(wú)菌室。
無(wú)菌室、緩沖走廊及緩沖間均設(shè)有日光燈及供消毒空氣用紫外燈,殺菌紫外燈離工作臺(tái)以1米為宜,其電源開(kāi)關(guān)均應(yīng)設(shè)在室外。
無(wú)菌室與緩沖間進(jìn)出口應(yīng)設(shè)拉門(mén),門(mén)與窗平齊,門(mén)縫要封緊,兩門(mén)應(yīng)錯(cuò)開(kāi),以免空氣對(duì)流造成污染。
建立管理制度:
制定并遵守?zé)o菌室管理制度,確保所有進(jìn)入無(wú)菌室的人員都了解并遵循相關(guān)規(guī)定。
二、無(wú)菌室的潔凈度要求
環(huán)境潔凈度:
無(wú)菌操作間應(yīng)滿(mǎn)足相應(yīng)潔凈級(jí)別的操作環(huán)境,環(huán)境應(yīng)符合萬(wàn)級(jí)潔凈度要求。具體標(biāo)準(zhǔn)為每立方米直徑大于等于0.5微米的塵埃粒子數(shù)應(yīng)小于等于350000個(gè),30分鐘塵降菌落數(shù)小于等于3cfu/立方米。
無(wú)菌室的空間潔凈度應(yīng)達(dá)到10000級(jí),但操作區(qū)域如超凈工作臺(tái)、生物安全柜里需要達(dá)到潔凈度100級(jí)。
定期檢測(cè):
對(duì)于無(wú)菌室的潔凈度,應(yīng)定期進(jìn)行檢測(cè),以確保其始終滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)要求。
三、無(wú)菌實(shí)驗(yàn)流程
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
對(duì)實(shí)驗(yàn)臺(tái)、手、檢驗(yàn)用具進(jìn)行消毒,確保無(wú)菌環(huán)境和無(wú)菌實(shí)驗(yàn)用品。
防護(hù)衣服、口罩、手套等必須佩帶,以減少微生物污染的風(fēng)險(xiǎn)。
實(shí)驗(yàn)操作:
在進(jìn)行接種或向培養(yǎng)皿內(nèi)倒培養(yǎng)基時(shí),試管口或瓶壁外面不要接觸皿底,試管或瓶口應(yīng)傾斜一下在火焰上通過(guò),以減少污染的風(fēng)險(xiǎn)。
四、物品消毒
物品消毒:
所有進(jìn)入無(wú)菌環(huán)境的物品都必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的消毒處理,包括實(shí)驗(yàn)用具、培養(yǎng)基、檢驗(yàn)樣品等。
五、其他措施
空氣流通:
無(wú)菌室內(nèi)應(yīng)保持良好的空氣流通,避免空氣死角,減少微生物滋生的機(jī)會(huì)。
紫外線照射:
定期使用紫外線燈對(duì)無(wú)菌室進(jìn)行照射消毒,以殺滅空氣中的微生物。
使用無(wú)菌技術(shù):
在實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中,應(yīng)使用無(wú)菌技術(shù),如無(wú)菌稱(chēng)樣、無(wú)菌接種等,以防止微生物的污染。
定期清潔與消毒:
定期對(duì)無(wú)菌室進(jìn)行清潔和消毒,包括地面、墻面、天花板、設(shè)備表面等,以保持其無(wú)菌狀態(tài)。
通過(guò)遵循以上步驟和要點(diǎn),可以有效地控制實(shí)驗(yàn)室的無(wú)菌環(huán)境,確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。